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化妝品中富含多種營養(yǎng)物質(zhì)，包括醇類，胺類，脂肪，蛋白質(zhì)，氨基酸，維生素，水等。不僅能夠提供微生物生長所需的豐富的碳源、氮源等營養(yǎng)成分,并利于微生物的生長和繁衍?；瘖y品被微生物污染化妝品后 會影響化妝品的品質(zhì), 可能導(dǎo)致外觀色澤、氣味的改變, 乳化體系、失去功效等; 另外化妝品因被微生物污染而變質(zhì)會對消費者的健康造成危害, 表現(xiàn)為對皮膚的刺激，以及引起疾病。微生物的特點是種類多，繁殖速度快，分布廣泛并容易變異。由于微生物這些特點，因此它存在于我們生活中的每一個角落，也導(dǎo)致了化妝品微生物的污染是多種多樣的，為化妝品的生產(chǎn)和保存帶來了困難?；瘖y品微生物的污染源可能在消費者使用過程中帶來的污染，也可能源于化妝品原料，產(chǎn)品包裝以及生產(chǎn)設(shè)備上的殘留物。為避免化妝品受到微生物污染，目前主要的方法是在產(chǎn)品中添加適量的防腐劑，以抵御微生物的一次污染或多次污染。通過防腐功效測試實驗對防腐效能進(jìn)行有效的評估，以判斷防腐體系是否足夠耐受微生物的污染。

       目前國內(nèi)外使用較多的防腐功效測試實驗，即微生物挑戰(zhàn)性試驗，主要有：美國藥典(USP)、美國檢驗方法及材料協(xié)會(ASTM E-640)、盥洗用品和香料協(xié)會(CTFA)、歐洲藥典(EP)、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO 11930-2012)等推薦的方法。微生物挑戰(zhàn)性試驗的基本原理是在化妝品中加入一定量的微生物，定期檢測微生物生長情況，以此判斷防腐劑的防腐效能。不同的國家、不同的組織采用的測試菌種、接種方式和接種次數(shù)、接種濃度和接種量、檢測周期和評價標(biāo)準(zhǔn)等都有所差異。

一、防腐功效實驗選用的測試菌種

防腐功效實驗中，菌種的選擇非常重要，選擇原則一般應(yīng)包括革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌，酵母菌，霉菌，這幾類微生物中每類至少選一種。或者還可以選擇產(chǎn)品生產(chǎn)、包裝、儲存和使用過程中有可能污染的微生物，這些污染的微生物能反映實際環(huán)境的污染狀況，加入到防腐功效測試，一定程度上能更加有效的評價防腐體系的抑菌性能。

二、接種方式和接種次數(shù)

在測試產(chǎn)品中加入特定的微生物的方式分為兩種：1.混合培養(yǎng)法;2純培養(yǎng)法(單一培養(yǎng)物)?；旌吓囵B(yǎng)法的優(yōu)勢是比較便捷，工作量小，通過一次挑戰(zhàn)測試就能完成幾種菌株的測試，模擬實際環(huán)境中微生物的特點，但混合培養(yǎng)法是不能有針對性的測試對每一種菌種的抑制效果。純培養(yǎng)法的優(yōu)點是能夠有針對性的測試防腐體系對每種測試菌種的抑制效果，更全面的評估防腐體系，缺點是一份試樣僅測試一種菌，工作量較大，測試情況不能完全模擬自然環(huán)境。接種次數(shù)主要是一次加菌，但特殊情況可多次加菌。一次加菌較適用于一次性使用產(chǎn)品，多次加菌較適用于容易被消費者反復(fù)接觸而污染的產(chǎn)品，而且多次加菌對防腐體系的抑菌能力要求更為嚴(yán)格，一定程度上需要增加防腐體系的用量。以下是5種防腐功效測試標(biāo)準(zhǔn)中推薦的接種方式和接種次數(shù)：

三、接種濃度和接種量

測試菌種用每種特定微生物最適的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，用無菌生理鹽水分散和轉(zhuǎn)移菌種(黑曲霉用無菌生理鹽水和吐溫80混合液來分散和轉(zhuǎn)移)，再用無菌生理鹽水(無菌生理鹽水和吐溫80混合液)稀釋至特定濃度后，用于測試樣品的加菌。細(xì)菌培養(yǎng)基推薦：胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)或大豆酪蛋白消化瓊脂培養(yǎng)基;真菌培養(yǎng)基推薦：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)或馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)。5種防腐功效測試標(biāo)準(zhǔn)方法中微生物接種濃度的數(shù)量級范圍基本一致。具體如下表所示：

菌懸液配制時，可以通過與麥?zhǔn)媳葷岱ㄖ械谋葷峁鼙葘Γ梢酝ㄟ^紫外分光光度計測定吸光度，可以使用血細(xì)胞儀或其他可重復(fù)的直接顯微鏡計數(shù)技術(shù)來初步確定菌懸液的濃度。最后，通過平板稀釋法，將菌懸液梯度稀釋后，平板計數(shù)確定菌懸液濃度值。

四、檢測周期

檢測時間節(jié)點的選擇，基本是7天，14天，28天，部分標(biāo)準(zhǔn)中，會針對特殊劑型產(chǎn)品增加檢測節(jié)點。

以上是化妝品防腐效能試驗方法簡單介紹，需要了解化妝品防腐效能試驗方法更詳細(xì)的內(nèi)容可以聯(lián)系簡愷生物的技術(shù)客服。簡愷生物實驗室檢測方法成熟，經(jīng)驗豐富。簡愷生物對每個產(chǎn)品都進(jìn)行防腐挑戰(zhàn)試驗并符合《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015版)的規(guī)定。